LAPORAN PRAKTIKUM PEMBUATAN MEDIA

 PEMBUATAN MEDIA

1. Tujuan Percobaan

          - Mampu mengetahui dan membuat beberapa macam media yang dibutuhkan oleh mikroorganisme untuk pertumbuhannya.

2. Dasar Teori

                   Mikroorganisme dapat ditumbuhkan dan dikembangkan pada suatu substrat yang disebut medium. Beberapa mikroorganisme dapat hidup baik pada medium yang sangat sederhana yang hanya mengandung garam anorganik ditambah sumber karbon organik seperti gula. Sedangkan mikroorganisme lainnya memerluka suatu medium yang sangat kompleks yaitu berupa mediumditambahkan darah atau bahan-bahan kompleks lainnya. Medium harus mengandung nutrien yang merupakan substansi dengan berat molekul rendah dan mudah larut dalam air. Nutrien dalam medium harus memenuhi kebutuhan dasar makhluk hidup, yang meliputi air, karbon, energi, mineral, dan faktor tumbuh.

                   Secara umum media dikelompokan menjadi 3 yaitu alami, semi buatan, dan buatan. Media ala : tape, nasi, tanah, dll. Media semi buatan : terbuat dari bahan kimia dengan bahan alami, misalnya agar tauge, agar kentang dextrose, dll. Media buatan : media yang seluruhnya dibuat dari bahan kimia, misalnya agar sabaurud, agar czapek Dak, dan lain-lain.

                   A. Macam – macam Media

                             Berdasarkan konsisten atau kepadatannya, medium dibagimenjadi 3 jenis, yaitu :

1. Media cair / broth / liquid medium.

     Contoh : air pepton, nutrien broth, laktosa, media kaldu nutrient.

2. Media setengah padat ( semi solid medium )

     Contoh : media kaldu agar tegak seni solid.

3. Medium padat ( solid medium )

     Contoh : media kaldu agar, media plate count agar, media agar sitrat sinmons.

              Menurut bentuknya, media dapat digolongkan dalam : media cair, media semi padat, dan medium padat. Media semi padat adalah media yang mengandung bahan sama dengan media cair, tetapi ditambah dengan agar-agar sehingga hampir padat. Medium padat yaitu medium cair yang ditambah agar-agar sehingga jadi padat.                       

Menurut kegunaannya, medium dapat digolongkan atas :

Ø Medium umum, yaitu medium yang umum dipakai untuk menumbuhkan mikroorganisme dimana berbagai mikroorganisme dapat tumbuh pada medium ini.

Ø Medium selektif , yaitu medium yang hanya dapat ditumbuhi mikroorganisme tertentu saja. Contoh : agar Endo, agar SS, agar Hs, dan lain-lain.

Ø Medium differensial, yaitu medium yang dapat ditumbuhi semacam mikroorganisme dengan memberikan ciri tertentu. Mikroorganisme tersebut mampu menguraikan salah satu bahan pembuat medium dimana mikroorganisme lain yang sama-sama tumbuh disitu tidak mampu. Contoh : agar darah, agar ecsin metilen blue, dan lain-lain.

Ø Medium pepaya, yaitu medium yang dipakai untuk menumbuhkan mikroorganisme tertentu sebelum ditumbuhkan pada medium yang dipakai dalam penelitian dengan maksud menyuburkan lebih dahulu mikroorganismetersebut.

B. Penyimpanan Media

                   Sebelum digunakan, medium yang sudah disterilkan, baik medium cair maupun medium padat, dapat disimpan didalam tabung-tabung gelas berupa erlenmeyer atau tabung-tabung gelas berupa erlenmeyer atau tabung reaksi ataupun dalam botol.

                   Penyimpanan dalam jumlah kecil biasanya dalam tabung reaksi sebanyak 10-15 ml untuk agar yang nantinya diperlukan untuk mengisi cawan petri. Sebanyak 5-7 ml untuk membuat agar miring yang diperlukan untuk menanam biakan, agar miring dibuat dengan memiringkan tabung reaksi berisi medium setelah disterilkan sebelum medium menjadi padat.

3. Alat dan Bahan

     Nutrient Agar ( agar kaldu )

Alat :

·        Gelas kimia                    1 buah

·        Pengaduk                       1 buah

·        Spatula                          1 buah

·        Kaca arloji                     1 buah

·        Cawan petri                   2 buah

·        Magnet stirer                 1 buah

·        Neraca analitik               1 buah

·        Hot plate                        1 buah

·        Aluminium foil

Bahan :

a.     NaCl                              5 gram

b.     Pepton                           5 gram

c.      Ekstrak daging               3 gram

d.     Aquadest                       1 liter

e.      Agar-agar (bacto)           18 gram

4. Langkah Kerja

1.     Mencampurkan a-d.

2.     Memanaskan hingga mendidih selama 5 – 10 menit.

3.     Mengambil dari atas api, menambahkan 3 – 5 ml NaOH 20% sambil diaduk dengan mnggoyangkan labu erlenmeyer, hingga bereaksi bisa terhadap brom – thymol blue.

4.     Membiarkan kotorannya mengendap.

5.     Menyaring melalui saringan kapas hingga bening.

6.     Memeriksa reaksinya terhadap “ brom – thymol blue “ 0,04% dan menetralkan hingga akhirnya diperoleh pH 6,8 – 7,0.

7.     Menambahkan agar-agar, menambahkan lagi sampai agar-agar larut semua ( kelihatan larutan bening ).

8.     Menstelirkan selama 20 menit pada suhu 120⁰c.

5. Data Pengamatan

Sifat fisik	Pengamatan
	Sebelum pendinginan	Sesudah pendinginan
Warna	Kuning	Kuning
Bentuk	Cair	Padat
Bau	Berbau	Tidak berbau

6. Analisa Percobaan

          Percobaan pembuatan media yang dilakukan adalah nutrient agar ( agar kaldu ). Percobaan dilakukan dengan mencampurkan semua bahan yang telah ditimbang, penimbangan dilakukan dengan cepat karena pepton bacto dan ekstrak daging bersifta higroskopis. Setelah semua tercampur dengan aquadest, dipanaskan gingga mendidih selama bebrapa menit. Pada saat pemanasan, larutan dimasukan magnetic stirer. Setelah larutan dididihkan menjadi bening, larutan didinginkan sampai larutan tersebut menjadi agar – agar padat.

7. Kesimpulan

          Setelah melakun percobaan maka dapat disimpulkan media yang dibuat harus disesuaikan dengan karakteristik dari jenis mikroba yang akan ditumbuhkan. Faktor lingkungan seperti suhu, pH, kecukupan nutrient media dan kontaminasi perlu dikondisikan sebaik mungkin agar mikroba yang ditumbuhkan berhasil.

8. Daftar Pustaka

• Jobsheet Rekayasa Bioproses “ Pembuatan Media”. Politeknik Negeri Sriwijaya. 2012

•  Sectoranalyst.blogspot.com/2011/10/pembuatan-media-agar-nutrient-nutrient.html

TITRASI PENGENDAPAN

TITRASI PENGENDAPAN

(PENETUAN KLORIDA)

1.      Tujuan Percobaan

Mahasiswa mampu melakukan standarisasi dan penetuan pada titrasi pengendapan dengan metode Mohr.

2.      Rincian Percobaan

1.      Standarisasi larutan AgNO₃

2.      Penetuan kadar klorida pada cuplikan.

3.      Dasar Teori

Titrasi pengendapan merupakan titrasi yang didasarkan pada reaksi pembentukkan endapan antara analit dengan titran. Terdapat tiga macam titrasi pengendapan yang dibedakan dari indicator yang digunakan :

1.      Metode Mohr

2.      Metode Volhard

3.      Metode adsorbsi

Pada titrasi yang melibatkan garam-garam perak, ada tiga indikator yang dapat dipergunakan. Metode Mohr menggunakan ion kromat CrO₄^2- untuk mengendapkan AgCrO₄ berwarna cokelat. Metode Volhard menggunakan ion Fe³⁺ untuk membentuk kompleks berwarna dengan ion tiosianat SCN^-. Dengan metode Fajans menggunakan indikator adsorbsi.

Seperti suatu sistem asam basadapat digunakan sebagai suatu indikator untuk titrasi asam basa, maka peembentukkan endapan dapat juga digunakan sebagai petunjuk akhir suatu titrasi. Pada metode Mohr, yaitu penentuan klorida dengan ion perak dengan indikator ion kromat, penamplan pertama yang tetap dari endapan perak kromat yang berwarna kemerah-merahan dianggap sebagai suatu titik akhir titrasi.

Merupakn hal yang diinginkan bahwa pengendapan indikator dekat pada titik ekivalen. Perak kromat lebih larut (sekitar 8,4 x 10^-5 mol/liter) dari pada perak klorida (1 x 10^-5 mol/liter). Jika ion perak ditambahkan kepada sebuah larutan yang mengandung ion klorida dalam konsentrasi yang besar dan ion kromat dalam konsentrasi yang kecil, maka perak klorida akan terlebih dahulu mengendap membentuk endapan berwarna putih, perak kromat baru akan terbentuk sesudah konsentrasi ion perak meningkat samap melampaui harga K_kel perak kromat.

Metide Mohr dapat juga digunakan untuk penentuan ion bromida dengan perak nitrat. Selain itu juga dapat menentukan ion sianida dalam larutan yang sedikit alkalis.

4.      Alat dan Bahan

·	Neraca Analitis	1 buah
·	Kaca Arloji	1 buah
·	Erlenmeyer 250 ml	6 buah
·	Buret 50 ml	2 buah
·	Pipet Ukur 25 ml	2 buah
·	Gelas Kimia 100 ml, 250 ml	2 buah
·	Labu Takar 100 ml, 250 ml	1,1 buah
·	Spatula	2 buah
·	Bola Karet	2 buah
·	Pipet Tetes	4 buah
·	Pengaduk	2 buah

Bahan yang digunakan

·         AgNO₃

·         Indikator K₂CrO₄

·         NaCl p.a

·         Cuplikan yang mengandung Cl

5.      Langkah Kerja

5.1  Menstandarisasi Larutan Baku AgNO₃

ü  Menimbang 4,25 gram perak nitrat dan menambahkan air aquadest sampai 250 ml dalam labu takar. Jaga jangan samapai terkena sinar matahari.

ü  Menimbang dengan teliti tiga cuplikkan Natrium Klorida yang murni dan kering seberat 0,20 gram dengan tiga Erlenmeyer 250 ml.

ü  Melarutkan tiap contoh dalam 25 ml aquadest dan tambahkan 2 ml 0,1 M kalium kromat.

ü  Mentitrasi cuplikkan dengan larutan nitrat sampai terjadi perubahan warna menjadi kemerah-merahan yang stabil.

5.2  Penetuan Klorida

ü  Menimbang dengan teliti cuplikan, melarutkan kedalam air samapi 100 ml.

ü  Mengambil 25 ml alikot massukan kedalam Erlenmeyer 250 ml.

ü  Menambahkan tiga tetes indikator kalium kromat.

ü  Mentitrasi dengan larutan baku perak nitrat sampai terjadi perubahan warna menjadi kemerah-merahan yang stabil.

6.      Data Pengamatan

6.1  Standarisasi Larutan Baku/Standar AgNO₃

No	Gram Analit (NaCl)	Volume Titran (AgNO3)
1	200 mg	35,3 ml
2	200 mg	34,5 ml
3	200 mg	35,3 ml
Jumlah Rata-rata		105,1 ml
		35,03 ml

6.2  Penetuan Cl^- dengan AgNO₃

No	Volume Analit	Volume Titran (AgNO3)
1	25 ml	18,8 ml
	25 ml	16,3 ml
	25 ml	16,0 ml
Jumlah Rata-rata		17,03 ml
		51,1 ml

7.      Perhitungan

7.1  Standarisasi Larutan AgNO₃

Menentukan normalitas AgNO₃  

200 mg 58,4428 mg/mek	=	35,0333 ml x N
NAgNO3	=	3,4221 mek 35,0333 ml
	=	0,097 N

7.2  Penetuan Klorida dengan AgNO₃

Menentukan % klorida dalam contoh :

Perhitungan Secara Praktek
% Cl	=	17,0333 ml x 0.097 mg/mek x 35, 453 mg/mek x 100                    500mg x 25/100
	=	46,86 %

8.      Analisa Percobaan

Pda percobaan titrasi pengendapan penentuan klorida yang bertidak sebagai analit adalah Cl. NaCl sebagai standar primer, K₂CrO₄ sebagai indikator, AgNO₃ sebagai titran, dan Kcl sebagai sampel.

Pada standarisasi larutan baku AgNO3 menimbang perak nitrat seberat 4,25 gram dan menambahkan 250 ml aquadest di dalam labu takar. Jangan samapai terkena sinar matahari setelah itu menimbang 0,20 gram natrium klorida dan melarutkannya dalam 25 ml air di dalam erlenmeyer 250 ml dan setelah itu mentitrasi Natrium Klorida dengan AgNO₃ sampai warnanya kemerah-merahan. Volume titrasinya 35,3 ml ; 34,5 ml ; dan 35,3 ml.

Pada penetuan klorida menimbang dengan teliti cuplikan dan melarutkannya dalam 100 ml air, dan mengambil 25 ml cuplikan sebagai alikot dan masukkan kedalam erlenmeyer 250 ml, menambahkan indikator ion cromat sebanyak 5 tetes. Setelah itu mentitrasi cuplikkan dengan AgNO₃ sampai warnanya kemerah-merahan yang stabil. Volume titrasinya 18,8 ml ; 16,03 ml ml ; dan 16,0 ml.

9.      Kesimpulan

Dari percobaan kali ini dapat disimpulkan :

Pada standarisasi larutan baku/standar AgNO₃ di dapatkan Normalitas = 0.097 N

Pada penentuaan klorida dengan AgNO₃ di dapatkan % Cl = 46,86  %

Pada perhitungan klorida secara teori didapatkan % Cl = 47,55 %

Pada perhitungan Persentase kesalahan didapatkan = 1,45 %

10.  Pertanyaan

10.1          Apakah yang dimaksud dengan argentometri?

10.2          Pada titrasi yang anda lakukan di atas, tuliskan apa yang bertindak sebagai :

•   Standar primer
•   Standar sekunder
•  Analit
•  Indikator

10.3          Tuliskan titrasi pengendapan yang bukan argentometri

Jawab :

10.1 Argentometri adalah semakin kecil kelarutan endapan maka makin sempurna reaksinya.

10.2

Standar primer	→	NaCl p.a
Standar sekunder	→
Analit	→	Cl-
Indikator	→	K2CrO4

10.3

Ion yang Ditemukan	Titran	Indikator
SO42-	Pb (NO3)2	Ditizon
	Pb (NO3)2	Eritrosin B
	Ba (ClO4)2	Torin
	BaCl2	Alizarin Merah
PO43-	Pb (Ac)2	Dibromofluorescein
	Pb (Ac)2	Diklorofluorescein
CrO42-	Pb (Ac)2	Fuerescein
Cl-, Br-	Hg2 (NO3)2	Biru Bromfenol

111.  Daftar Pustaka

Jobsheet.Kimia Analisis Kimia/Politeknik Negeri Sriwijaya/2012